dapi全称 – dapi怎么用

句子百科 • 2022年 11月 12日上午12:03 • 区块链

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　　DAPI细胞染色液(DAPI Staining Solution)是适用于常见细胞和组织细胞核染色的染色液。DAPI，即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride，也称DAPI dihydrochloride，分子式为C16H15N5 · 2HCl ，分子量为350.25。可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，灵敏度高于EB。

　　DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。DAPI的最大激发波长为340nm，最大发射波长为488nm，DAPI和双链DNA结合后，最大激发波长为364nm，最大发射波长为454nm。本DAPI染色液可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，亦可以按照具体实验要求，稀释到相应浓度后进行染色。一般推荐工作浓度为0.5ug～10ug/ml。

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　　OGD模型即糖氧剥夺(OGD)离体脑缺血模型

　　糖氧剥夺(Oxygen and glucose deprivation,OGD)模型:

　　此法可模拟在体脑缺血模型，又称离体缺血模型。

　　我们拥有美国公司生产的三气培养箱，通过直接通入N2的方式精确控制培养箱内CO2和O2浓度，同时剥夺神经元培养基中的糖，从而造成培养神经元缺氧缺糖的环境，模拟在体脑缺血的情况。

　　实验如下

　　目的：探讨一种简便、稳定、可重复的大鼠成年神经干细胞体外氧糖剥夺/复氧模型的制备方法。

　　方法：以来自于成年Fisher344大鼠的海马神经干细胞系为研究对象，以无血清培养基培养并传代，并用nestin和DAPI免疫荧光双染确认其生物学特性。

　　将三气培养箱氧气浓度调至1％以制备缺氧环境，将培养基换为不含葡萄糖的Earle′s平衡盐溶液，分别缺氧缺糖2h、4h、6h、8h、10h后取出细胞。

　　恢复正常条件继续培养24 h后倒置显微镜下观察细胞形态学变化，CCK-8比色法检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡率。同时设置常氧常糖的正常对照组。

　　结果：与正常对照组相比,缺氧缺糖2h组细胞吸光度值明显升高，细胞存活率有一定的增长，但差异无统计学意义(P＞0.05)。

　　随着缺氧缺糖时间延长，神经干细胞形态学损伤逐渐加重，细胞吸光度值逐渐下降，缺氧缺糖6h后与正常对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。